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Miércoles 30 de septiembre 2020   BUSQUEDA
   
   
Cortés   Liliana Jazmín, Duque Beltrán Sofía, López  Miryam Consuelo, Moncada  Diego, Molina  Diego, Gómez Marín Jorge Enrique, Gunturíz  María Luz.
Polimorfismos en los genes de dihidrofolato-reductasa (dhfr) y dihidropteroato-sintasa (dhps) y modelado estructural del gen dhps en aislamientos colombianos de Toxoplasma gondii
Biomédica 2014; 34(4)  : 556-566

Resumen
 

Introducción: No existen reportes sobre las variaciones en la secuencia de los genes blanco de los medicamentos anti-Toxoplasma en aislamientos provenientes de Suramérica.

Objetivo: Clonar y secuenciar los genes de la dihidrofolato-reductasa (dhfr) y la dihidropteroato-sintetasa (dhps) de la cepa de referencia RH y de dos aislamientos colombianos de Toxoplasma gondii.

Materiales y métodos: Se obtuvieron dos aislamientos de T. gondii en líquido céfalorraquídeo de pacientes colombianos positivos para HIV con toxoplasmosis cerebral. Se extrajo el ADN de los genes dhfr y dhps y se amplificaron mediante reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Los productos fueron clonados en el vector pGEM-T y secuenciados.

Resultados: Se encontró un cambio de adenina por guanina (A↔G) en la posición 235 del exón 2 del gen dhps, dos cambios de guanina por citocina (G↔C) en las posiciones 259 y 260 y un cambio de timina por guanina (T↔G) en la posición 371 del exón 4 del gen dhps. Por análisis bioinformático, en este último exón se identificó un polimorfismo no sinónimo en la región codificante, que podría llevar al cambio de una Glu (CAA o CAG) por una His (codificada por los codones AAU o AAC). Se calculó el modelo estructural de la enzima dihidropteroato-sintetasa (DHPS) de T. gondii y se identificaron las modificaciones en la estructura secundaria ocasionadas por las mutaciones.

Conclusiones: La metodología estandarizada puede servir como base para la búsqueda de polimorfismos en muestras de pacientes con diferentes manifestaciones clínicas de toxoplasmosis y para establecer su posible relación con los cambios en la sensibilidad a los antifolatos y la reacción al tratamiento.


Palabras clave: Toxoplasma, reacción en cadena de la polimerasa, resistencia a medicamentos, ácido fólico/antagonistas e inhibidores, conformación molecular.
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