Resumen

Acumulación celular y efecto anti-Leishmania de la protoporfirina IX exógena y endógena después del tratamiento fotodinámico Introducción: El tratamiento fotodinámico con ácido 5-aminolevulínico como inductor de la protoporfirina IX (ALA-PpIX) constituye una alternativa interesante en el tratamiento de la leishmaniasis cutánea. Objetivo: Evaluar la producción de protoporfirina IX (PpIX) a partir de la administración de ALA o MAL y el efecto de la PDT con ALA a nivel celular en células THP-1 no infectadas e infectadas con Leishmania (Viannia) panamensis o Leishmania (Leishmania) infantum (syn. Leishmania chagasi). Materiales y métodos: La producción de protoporfirina IX y su ‘colocalización’ mitocondrial se evaluaron mediante microscopía ‘confocal’. Se evaluó la toxicidad celular después del tratamiento con los compuestos y la aplicación de irradiación de luz (597-752 nm) en una fluencia de 2,5 J/cm2 mediante el empleo de la prueba colorimétrica con metil-tiazol-tetrazolio (MTT) en las células, y de métodos microscópicos estándar en los parásitos. Los resultados se expresaron como la concentración del compuesto activo en el 50% de las células o parásitos (CC₅₀ o CI₅₀). Resultados: El ácido aminolevulínico o el metil-5-aminolevulinato indujeron la protoporfirina IX endógena en células humanas, y se observó fluorescencia de color rojo en las mitocondrias. La actividad del ácido aminolevulínico y del metil-5-aminolevulinato utilizados con terapia fotodinámica fue similar en las células THP-1 (CC₅₀ 0,16±0,01 mM y 0,33±0,019 mM, respectivamente) y, aparentemente, no inhibió los parásitos en las células infectadas, en comparación con los controles. El tratamiento exógeno con protoporfirina IX y terapia fotodinámica fue tóxico para las células THP-1 (CC₅₀ 0,00032 ±0,00002 mM) y para los promastigotes de L. (L.) infantum (IC₅₀ 0,003±0,0001 mM) y L. (V.) panamensis (CI₅₀ 0,024±0,0001 mM). Conclusiones: A pesar de la ‘fotoactividad’ del tratamiento con protoporfirina IX en promastigotes y de su producción después del tratamiento con ácido aminolevulínico y metil-5-aminolevulinato en las células infectadas con Leishmania, no se observó daño en los amastigotes presentes en las células de L. (L.) infantum o L. (V.) panamensis.

Palabras clave: Ácido aminolevulínico fotoquimioterapia Leishmania (Viannia) panamensis Leishmania infantum.

2015-01-29   |   1,283 visitas   |   Evalua este artículo 0 valoraciones

Vol. 34 Núm.4. Octubre-Diciembre 2014 Pags. 589-597 Biomédica 2014; 34(4)