Identificación molecular del gen RhD mediante PCR

Autores: Saavedra Trejo Manuel Román, Rosenfeld Mann Fany, Baptista González Héctor Alfredo

Resumen

Introducción: Con objeto de identificar al gen RhD en sujetos Rh positivo, se elaboró una estrategia basada en la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Material y Métodos: Se estudiaron a ocho sujetos adultos, identificando el fenotipo del sistema Rh (CcDEe) con técnicas inmunohematológicas. Se extrajo el DNA genómico a partir de leucocitos de sangre periférica y se utilizaron dos iniciadores (R24C y R13N) para la amplificación. Este par de iniciadores delimitan las secuencias comunes entre los exones 4 y 5 de los genes RhD y RhCE. Resultados: Inmunológicamente se identificaron cinco sujetos Rh negativo y tres Rh positivo. En la imagen electroforética, se observaron dos patrones de amplificación: uno de dos bandas (de 600 pb y de 1,200 pb) y un segundo patrón de una sola banda (de 1,200 pb). La banda de 1,200 pb se amplificó en los sujetos Rh positivo y negativo (y corresponde al gen RhCE). La banda de 600 pb, sólo se presentó en sujetos Rh positivo (correspondiente al gen RhD). No hubo diferencias entre los resultados inmunohematológicos y el análisis molecular en los diferentes fenotipos. Conclusiones: El empleo de esta estrategia basada en la técnica de PCR, permite la tipificación del gen RhD en los sujetos Rh positivo, con diferentes fenotipos del sistema Rh.

Palabras clave: Grupo sanguíneo Rh gen RhD PCR enfermedad hemolítica del recién nacido.

2003-03-18   |   2,703 visitas   |   1 valoraciones

Vol. 12 Núm.2. Abril-Junio 1998 Pags. 82-89. Perinatol Reprod Hum 1998; 12(2)