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Introducción Los sistemas de liberación sostenida son biomateriales que atrapan o encapsulan una sustancia activa para liberarla localmente en un sitio específico en los tejidos bucales (1). Las microesferas (ME) de ácido poli-láctico (PLA por sus siglas en inglés) son un ejemplo de tales sistemas; pueden colocarse en los tejidos bucales y liberar una sustancia antimicrobiana en una zona con una infección (2-4). La capacidad de liberación sostenida hace a las ME-PLA muy atractivas para diversas aplicaciones en estomatología (1). Las ME-PLA se formulan con la técnica de doble emulsión, es una técnica compleja que requiere un control de parámetros como relación polímero-solvente adecuada, velocidad de agitación, temperatura, etc. (5-7). Todos los parámetros impactan en las características físicas de las ME-PLA, por ejemplo, determinarán el tamaño de las ME, las características de la superficie, el comportamiento de liberación de la sustancia activa, etc. Es un reto lograr la formulación de ME en con propiedades homogéneas, por eso es necesario experimentar en la preparación de las ME para obtener el sistema deseado. La experimentación en la formulación de ME-PLA cargadas con clorhexidina es interesante porque busca obtener un sistema de liberación sostenida que pueda ser llevado a las encías con enfermedad periodontal, en especial para colocar las ME-PLA en una lesión periodontal afectando hueso (8, 9). Las ME-PLA se degradarán en los tejidos, porque el PLA es un polímero biodegradable al contacto con el agua, y liberarán la clorhexidina (CHX). Así las ME-PLA podrían colocarse por un periodo de días o incluso semanas para participar en la eliminación bacteriana. Para eso, es necesario primero formular ME-PLA cargadas con CHX, caracterizarlas en su tamaño y además evaluar su efecto in vitro en la viabilidad celular, todo antes de hacer una evaluación de su efecto antimicrobiano. Por ese motivo, el objetivo de nuestro estudio fue formular ME-PLA cargadas con CHX y evaluar su efecto en la viabilidad celular in vitro de una línea celular de osteoblastos. Materiales y métodos Se formularon ME-PLA con la técnica de doble emulsión; en breve, 200 mg de PLA fueron disueltos en 4 mL de diclorometano, la solución fue agitada en un vórtice para lograr una apariencia transparente y homogénea. Enseguida, 0.5 mL de clorhexidina al 2% fueron agregados para formar una primera emulsión; la primera emulsión fue agitada en un vórtice y después fue vertida en alcohol poli-vinílico (APV) en agitación (750 RPM) para obtener una segunda emulsión. La segunda emulsión se separó en microgotículas que cristalizaron por la evaporación del diclorometano para formar las micropartículas, este proceso duró 2 horas. Las ME-PLA-CHX formadas fueron colectadas al filtrar el APV. Posteriormente se obtuvieron las muestras y fueron incubadas con osteoblastos durante 24 horas; medio de incubación fue colectado y empleado para realizar un ensayo de viabilidad celular MTS; este ensayo evalúo la actividad mitocondrial de las células con la producción de la tinción de formazán. Así, se asoció la viabilidad celular con la presencia de formazán medido por absorbancia (490 nm) en un espectrofotómetro para multiplaca. Resultados Se formularon 2 lotes de ME-PLA-CHX, el lote que se formuló con 0.5 mL de CHX al 2% tuvo ME con un diámetro prome- dio de 115.8 + 39.5 um (Lote 1); mientras que el lote que se formuló con 0.6 mL de CHX al 2% tuvo ME con un diámetro promedio de 124.3 + 39.4 um (Lote 2) (sin diferencias estadísticas significativas entre los lotes). En cuanto al ensayo de viabilidad celular, se encontró una absorbancia de 1.7697 para el control negativo, una absorbancia de 0.6409 para el control positivo, una absorbancia de 0.2497 y 0.2863 para las ME-PLA-CHX del lote 1 y lote 2 respectivamente. El PLA como grupo comparativo indujo una absorbancia de 1.6510 mientras que una solución de CHX al 2% causó una absorbancia de 0.2313. Hubo diferencias estadísticas significativas (Kruskal-Wallis) al comparar los resultados de la absorbancia de las ME-PLA-CHX, la CHX al 2%, el control negativo y el PLA. Discusión Se formularon exitosamente ME-PLA con CHX; el método de doble emulsión fue eficaz para la formación de tales sistemas de liberación controlada. Y los parámetros empleados dieron por resultado ME con un tamaño adecuado para ser llevadas por una cucharilla dental a los tejidos periodontales. Vistas macroscópicamente, las ME semejan un polvo blanco que puede ser manipulado fácilmente. En cuanto a su impacto en la viabilidad celular, se observó que las ME-PLA-CHX causan un efecto negativo, esto puede deberse a la CHX, pues otros estudios han reportado que es una solución que puede causar daño celular (8, 10). En un futuro debe explorarse el uso de CHX en menor concentración. Conclusiones Se formularon dos lotes de ME-PLA cargadas con CHX al 2%; las ME mostraron una absorbancia menor que la absorbancia del control positivo y del control negativo.

Palabras clave: clorhexidina estomatología liberación sostenida microesferas.

2022-01-26   |   278 visitas   |   Evalua este artículo 0 valoraciones

Vol. 13 Núm.1. Enero-Junio 2018 Pags. 89-91 Rev Invest Cien Sal 2018; 13(Supl. 1)