Completo

Introducción

La resistencia antibacteriana ha emergido como una de las principales amenazas para la salud pública mundial, impulsada en gran parte por el uso indiscriminado e inadecuado de antibióticos en humanos, animales y agricultura. Este fenómeno no solo compromete la efectividad de los tratamientos médicos convencionales, sino que también incrementa la mortalidad, prolonga las estancias hospitalarias y aumenta los costos de la atención médica en todo el mundo(1). Dentro de los patógenos de mayor relevancia, Staphylococcus aureus, una bacteria Gram-positiva ampliamente distribuida, destaca como una causa significativa de infecciones en piel, tracto respiratorio y sistema urinario, responsable de numerosas infecciones en entornos tanto hospitalarios como comunitarios, donde puede transmitirse rápidamente entre personas y superficies contaminadas (2). Particularmente alarmante es la aparición de cepas de S. aureus resistentes a la meticilina (MRSA, por sus siglas en inglés), que representan un importante desafío en el ámbito clínico debido a su capacidad para evadir los efectos de los antibióticos más comúnmente utilizados (3). Estas cepas han desarrollado múltiples mecanismos de resistencia, incluyendo la producción de proteínas de unión modificadas y la expresión de bombas de expulsión, lo cual reduce las opciones terapéuticas y obliga a buscar alternativas efectivas para el tratamiento de estas infecciones complicadas (4). En la búsqueda de soluciones alternativas, los compuestos naturales han ganado atención como recursos potencialmente efectivos para combatir la resistencia bacteriana. Uno de estos compuestos es el propóleo, una sustancia resinosa que las abejas recolectan de las yemas y exudados de plantas. Con una composición química sumamente variable, el propóleo es rico en flavonoides, ácidos fenólicos y compuestos polifenólicos, los cuales contribuyen a su actividad biológica, destacando propiedades antimicrobianas, antioxidantes y antiinflamatorias (5). La variabilidad en su composición se debe a factores geográficos, climáticos y estacionales, lo que afecta directamente su perfil de actividad antimicrobiana (6, 7, 8). A nivel global, se han realizado estudios que destacan la eficacia del propóleo contra una amplia gama de microorganismos, incluidos aquellos con resistencia múltiple a antibióticos. En investigaciones recientes, se ha demostrado que el propóleo ejerce una acción bactericida significativa frente a patógenos resistentes, incluyendo S. aureus. Por ejemplo, el propóleo ha mostrado efectos inhibitorios y sinérgicos cuando se utiliza en combinación con ciertos antibióticos, lo cual puede reducir las dosis requeridas de estos últimos y mitigar sus efectos adversos (9,10). Sin embargo, aún existe una limitada literatura científica sobre la variabilidad en la actividad del propóleo de distintas regiones y su potencial como agente terapéutico. En este contexto, el presente estudio se centra en el análisis de la actividad antibacteriana del extracto etanólico de propóleo recolectado en la región de Catemaco, Veracruz, México, específicamente frente a cepas de S. aureus resistentes a antibióticos, empleando el método de difusión en agar. La evaluación de este tipo de extracto puede ofrecer una perspectiva útil sobre el uso potencial del propóleo como una alternativa eficaz en el combate contra las infecciones resistentes, aportando al desarrollo de terapias antimicrobianas basadas en productos naturales (9,11).

Material y métodos

Recolección y preparación del propóleo: El propóleo utilizado fue recolectado de dos apiarios ubicados en la región de Catemaco, Veracruz, México, durante el periodo de primavera. Las muestras se mantuvieron a 4°C para preservar sus componentes bioactivos hasta su procesamiento, conforme a estudios previos que destacan la importancia de la temperatura en la conservación del propóleo (12). Antes de la extracción, el propóleo fue limpiado para eliminar impurezas visibles como restos de cera o materiales extraños, lo que asegura una mayor pureza del extracto final (13). Preparación del extracto etanólico de propóleo (EEP): El extracto etanólico de propóleo se preparó mediante el método de maceración, una técnica común para extraer compuestos bioactivos (14). Se utilizaron 100 g de propóleo previamente limpio, disueltos en 500 mL de etanol al 70%. La mezcla se mantuvo en agitación constante durante 7 días a temperatura ambiente y protegida de la luz, un protocolo recomendado para maximizar la extracción de polifenoles y flavonoides (15). Posteriormente, la solución fue filtrada con papel de filtro Whatman No. 1 para remover las partículas insolubles, y el filtrado fue almacenado en frascos ámbar a 4 °C hasta su utilización en los ensayos antibacterianos, figura 1(16,17). Figura 1. Proceso de extracción del propóleo con etano Cepas Bacterianas: Las cepas de Staphylococcus aureus resistentes a antibióticos fueron obtenidas del laboratorio de microbiología clínica del Hospital General de Veracruz y confirmadas mediante pruebas bioquímicas, incluyendo catalasa y coagulasa, además de la capacidad de fermentar manitol, características distintivas de S. aureus (17). Como control negativo se incluyeron cepas de Escherichia coli, un organismo de referencia para pruebas de sensibilidad antibacteriana (16). Prueba de susceptibilidad antibacteriana: La actividad antibacteriana del extracto etanólico de propóleo fue evaluada mediante el método de difusión en agar (Kirby-Bauer), que es ampliamente reconocido para determinar la eficacia antimicrobiana de compuestos naturales (18). Placas de agar Müeller-Hinton fueron inoculadas con una suspensión de S. aureus ajustada a una turbidez equivalente al estándar 0.5 de McFarland. Discos estériles de 6 mm de diámetro fueron impregnados con 20 μL de EEP al 15% y colocados en las placas inoculadas. Se incluyeron discos de antibióticos comerciales, vancomicina y oxacilina, como controles positivos, y discos impregnados con etanol al 70% como control negativo, verificando que el solvente no presentara actividad antimicrobiana (19). Incubación y medición: Las placas fueron incubadas a 37 °C durante 24 horas. Al finalizar el periodo de incubación, se midieron los diámetros de los halos de inhibición alrededor de los discos impregnados con el EEP, comparándose con los resultados de los controles. Las mediciones se registraron en milímetros (20). Análisis estadístico: Los datos obtenidos de los diámetros de los halos de inhibición se analizaron estadísticamente mediante el software SPSS. Al realizar el experimento por triplicado, se calcularon las medias y desviaciones estándar. Se llevó a cabo un análisis de varianza (ANOVA) de un solo factor seguido de la prueba de comparación múltiple de Tukey, considerando diferencias significativas con un valor de p < 0.05 (21).

Consideraciones éticas

El presente estudio se apegó a las Pautas Éticas Internacionales para la Investigación y Experimentación Biomédica en Seres Humanos de la Organización Mundial de la Salud. Ginebra 2002 y de la Organización Panamericana de Salud 2017.

Conflicto de intereses

Los autores manifiestan no tener conflicto de intereses para la publicación del presente artículo.

Financiación

El estudio se realizó con los recursos propios de la Institución. No se obtuvieron recursos externos

Resultados 

Actividad antibacteriana del extracto etanólico de propóleo: La actividad antibacteriana del extracto etanólico de propóleo se evaluó mediante el método de difusión en agar. Se realizaron pruebas por triplicado para asegurar la reproducibilidad de los resultados, y se observó que el extracto exhibió una notable capacidad para inhibir el crecimiento de Staphylococcus aureus resistente a antibióticos. Comparación con controles: El extracto etanólico de propóleo mostró un diámetro de halo de inhibición de 15.2 mm, que aunque es menor que el de la vancomicina (22.5 mm), fue significativamente mayor que el de la oxacilina (11.8 mm) y el control negativo (0 mm). El análisis de varianza (ANOVA) reveló diferencias significativas entre el propóleo y los controles (p < 0.05), tabla 1 y gráfica 1. Observaciones adicionales: Durante las pruebas, se observó que el extracto etanólico presentaba un color marrón oscuro y una consistencia viscosa, lo que es característico del propóleo de la región. Además, se notó que el extracto no mostró actividad antibacteriana contra las cepas de Escherichia coli utilizadas como control, indicando una especificidad en la acción del propóleo contra S. aureus.

Discusión

Los resultados de este estudio indican que el extracto etanólico de propóleo presenta una actividad antibacteriana significativa contra Staphylococcus aureus resistente a antibióticos, con un diámetro de halo de inhibición de 15.2 mm. Este hallazgo es consistente con investigaciones anteriores que han reportado la eficacia del propóleo frente a diversas cepas de S. aureus, lo que sugiere que los compuestos bioactivos presentes en el propóleo, como flavonoides y ácidos fenólicos, podrían ser responsables de su actividad antimicrobiana (22,23,24,25). A pesar de que el diámetro de inhibición del propóleo es menor que el observado para la vancomicina (22.5 mm), el hecho de que el propóleo muestre actividad frente a cepas resistentes a antibióticos es significativo, dado el creciente problema de la resistencia bacteriana en la medicina moderna. Esto sugiere que el propóleo podría ser considerado como una alternativa o complemento en el tratamiento de infecciones causadas por S. aureus, especialmente en contextos donde los antibióticos convencionales han fallado (26, 27). El hecho de que no se observara actividad antibacteriana contra las cepas de Escherichia coli también indica una especificidad en la acción del propóleo. Esto podría deberse a diferencias en la estructura de la pared celular entre bacterias Gram-positivas y Gram-negativas, donde E. coli tiene una membrana externa que proporciona una barrera adicional frente a compuestos antimicrobianos. Esta observación resalta la necesidad de estudios adicionales que evalúen la actividad del propóleo contra un espectro más amplio de patógenos, así como la identificación de los compuestos específicos responsables de su actividad antimicrobiana. Además, el método de extracción utilizado en este estudio ha demostrado ser eficaz para obtener un extracto rico en compuestos bioactivos. Los estudios previos han indicado que el uso de etanol como solvente permite extraer de manera más efectiva los componentes solubles responsables de la actividad antibacteriana del propóleo. Sin embargo, es fundamental realizar análisis de calidad y estandarización de los extractos para asegurar su eficacia y seguridad en aplicaciones clínicas.

Conclusión

El extracto etanólico de propóleo presenta un gran potencial como agente antibacteriano frente a Staphylococcus aureus resistente a antibióticos. Se requieren más investigaciones para evaluar su efectividad en condiciones clínicas y su potencial uso como tratamiento complementario en la lucha contra las infecciones bacterianas resistentes.

Palabras clave: Propóleo Staphylococcus aureus resistencia antibacteriana extracto etanólico

2025-09-01   |   54 visitas   |   Evalua este artículo 0 valoraciones

Vol. 20 Núm.1. Enero-Junio 2025 Pags. 44-50 Rev Invest Cien Sal 2025; 20(1)