Resumen

Se moduló la actividad patogénica de Escherichia coli TL+ (termolábil) y la subunidad A de la toxina de Vibrio cholerae (ADP ribosiltransferasa) utilizando fracciones proteínicas aisladas de Giardia intestinalis, así como un péptido sintético, obtenido de la secuencia de la proteína ARF (Factor de ribosilación) de Giardia intestinalis; esta reacción enzimática in vitro fue demostrada in vivo. Material y métodos: De 1 x 10⁹ trofozoítos de Giardia intestinalis cepa Portland I se obtuvieron por isoelectroenfoque fracciones proteínicas con pH entre 6.5 y 9.5. Se utilizaron diferentes concentraciones de la fracción pH 6.8 para llevar a cabo mezclas de reacción enzimática (ADP ribosiltransferasa) incubándolas con Escherichia coli TL+ cepa H10407. En la reacción in vivo se empleó el intestino delgado de conejos machos albinos de la raza Nueva Zelanda formando asas ligadas, en las que se inocularon las mezclas de reacción enzimática antes mencionadas, así como las obtenidas con un heptapéptido sintético (182-190) de la secuencia de la proteína ARF de Giardia con la subunidad A de la toxina de Vibrio cholerae. La actividad de la toxina fue evaluada por la secreción de líquido luminal en las asas y la concentración de AMP cíclico en el tejido. Resultados: Al utilizar diferentes concentraciones de la fracción pH 6.8 se moduló la actividad de ADP ribosiltransferasa de la toxina TL+ de Escherichia coli, considerando la disminución en el volumen de líquido luminal y AMPc en el tejido de las asas. Se observó el mismo resultado con el péptido sintético y la subunidad A de la toxina de Vibrio cholerae. Conclusiones: Se hizo evidente la presencia de una proteína ARF (factor de ADP ribosilación) en la fracción proteínica pH 6.8 aislada de Giardia intestinalis, así como en el péptido sintético obtenido de la secuencia de la proteína ARF. La especificidad demostrada por la reacción in vivo infiere la posibilidad de modular el efecto patogénico de estas toxinas sobre epitelio intestinal abriendo la posibilidad de utilizarse en forma terapéutica.

Palabras clave: Proteínas ARF toxina termolábil adenilato ciclasa.

2002-12-03   |   4,107 visitas   |   3 valoraciones

Vol. 53 Núm.4. Julio-Agosto 2001 Pags. 340-345 Rev Invest Clin 2001; 53(4)