Producción de los reactivos primarios de un sistema inmunoenzimático Elisa para determinar lipoproteína (a)

Autores: Pereira Roca Giovanna, Reyes Durán Arturo, Adreu Arce Mireya

Resumen

El objetivo de nuestro trabajo fue desarrollar la metodología y la producción de los reactivos primarios para realizar un método inmunoenzimático (ELISA) tipo sandwich para determinar lipoproteína (a) en suero humano. La concentración final del antisuero policlonal antiapolipoproteína (a) (anti-apo [a]) obtenida fue de 1,3 mg-dL, purificado, por cromatografía de afinidad y de intercambio iónico. El antisuero antilipoproteína de baja densidad (anti LDL) de carnero purificado por cromatografía de afinidad fue utilizado en la obtención del conjugado policlonal peroxidasa-IgG anti-LDL. La concentración óptima de recubrimiento con anti-apo (a) fue de 2 mg/mL y la dilución óptima del conjugado fue 1/7000, con lo cual obtuvimos una sensibilidad alta del ensayo. Poder producir en nuestro laboratorio reactivos primarios para el desarrollo de un sistema inmunoenzimático de determinación de Lp (a) hace posible la accesibilidad de la determinación con fines asistenciales e investigativos, así como un ahorro en moneda libremente convertible, pues estos reactivos tienen un elevado costo en el mercado.

Palabras clave: Lipoproteina (A)/sangre apolipropetinas A/aislamiento y purificacion apoliproteínas A/inmunologia lipoproteínas LDL/aislamiento y purificacion lipoproteínas LDL/inmunologia test de Elisa/metodos juego de reactivos para diagnóstico.

2003-09-30   |   992 visitas   |   2 valoraciones

Vol. 8 Núm.3. Septiembre-Diciembre 1997 Pags. 230-235 Rev Cubana Endocrinol 1997; 8(3)