Validación analítica de la medición de la hormona luteinizante (LH) por inmunoensayo enzimático automatizado y detección por quimioluminiscencia

Autores: Fonseca Yerena María Eugenia, Mendoza Narea Carmen, Velásquez Silvia, Ruiz Miriam, Zárate Treviño Arturo

Resumen

Se informan los resultados del estudio de validación de la técnica inmunométrica para la hormona luteinizante (LH) con el equipo automatizado "Immulite", que utiliza la quimioluminiscencia como sistema de detección. El método usa dos anticuerpos contra LH, uno de ellos monoclonal está unido a la fase sólida y une específicamente a la LH; el segundo que es policlonal, está conjugado con fosfatasa alcalina, reconoce también a la LH y se une al complejo formado previamente, introduciendo la marca enzimática. Una vez efectuada la reacción, se elimina la fracción no unida, se lava la fase sólida y se añade el sustrato quimioluminiscente que al ser hidrolizado por la enzima, genera luz en cantidad proporcional a la concentración de LH en la muestra biológica. El inmunoensayo tiene un límite de detección de 0.56 UI/L y linearidad de la curva de calibración hasta 400 UI/L sin que se presente "efecto hook". El perfil de precisión de la curva de calibración mostró CV<2%, en los sueros la precisión fue dependiente de la concentración, los CV variaron de 0.5-9% con un CVx de 3.02%. Las muestras para el control de calidad, de concentración baja, media y elevada, analizadas repetidamente en el ensayo tuvieron un CV intraensayo <3.5 %; la variación interensayo fue < 4% en dos de los controles, en el control bajo aumentó a 6.5%. En las cartas de control de calidad los valores de LH se mantuvieron dentro de los límites de dos desviaciones estándar (DE). Las muestras de concentración elevada analizadas en varias diluciones, mostraron que el método mantiene la linearidad desde concentraciones bajas hasta concentraciones elevadas, con un coeficiente de correlación de 0.998. La exactitud determinada por la recuperación de cantidades conocidas de LH que se añadieron a muestras de suero, varió de 86-104 % con un valor promedio de 97.5 %. No se observaron interferencias por hemólisis o lipemia, ni reacción cruzada con otras glicoproteínas como la hormona folículo estimulante (FSH), tirotropina (TSH) y gonadotropina coriónica (CG). Los valores de LH en Immulite, tuvieron un buen índice de correlación (r=0.918) con los obtenidos por Radioinmunoanálisis, no obstante las concentraciones en el inmunoanalizador son 2-3 veces menores que las del RIA y estadísticamente diferentes (p < 0.00 l). Por lo anterior se concluye que la medición de LH en Immulite llena los requisitos de control de calidad, pero se requiere de una validación clínica y contar con los valores de referencia para cada laboratorio.

Palabras clave: Hormona luteinizante inmunoanalizador immulite validación analítica inmunoensayo.

2004-02-16   |   3,689 visitas   |   Evalua este artículo 0 valoraciones

Vol. 24 Núm.1. Enero-Marzo 1999 Pags. 11-17 Bioquimia 1999; 24(1)