Amplificación isotérmica de ácidos nucleicos tipo LAMP para la detección de Plasmodium:

nueva técnica diagnóstica 

Autores: Arroyo A María Isabel, Morales L Gloria Patricia, Sosa V Paula Andrea, Carmona Fonseca Jaime, Maestre Buitrago Amanda Elena

Resumen

Recientemente se introdujo en el diagnóstico de malaria una técnica llamada amplificación isotérmica de ácidos nucleicos, que usa el material genético plasmodial. Este escrito revisa la información disponible sobre amplificación isotérmica de ácidos nucleicos, especialmente en el campo del paludismo. Metodología: Se revisaron las bases electrónicas Lilacs, Scielo, PubMed (Medline) y Ovid. Resultados: Solo se encontraron tres referencias sobre amplificación isotérmica de ácidos nucleicos y malaria pero hubo abundante información sobre amplificación isotérmica de ácidos nucleicos en otras infecciones y campos de la medicina, en especial la infectología. La reacción de amplificación isotérmica de ácidos nucleicos requiere de una ADN polimerasa con actividad de desplazamiento de cadena y cuatro cebadores especialmente diseñados para reconocer seis secuencias distintas. Esto garantiza alta especificidad para la amplificación. Varias alternativas de amplificación isotérmica de ácidos nucleicos se han desarrollado para la identificación de virus, bacterias, micoplasmas, protozoos, hongos y levaduras. Ventajas de amplificación isotérmica de ácidos nucleicos son capacidad de amplificar ácidos nucleicos bajo condiciones isotérmicas (60-65ºC); posibilidad de lectura y semicuantificación a simple vista y de cuantificación con un turbidímetro; altas sensibilidad y especificidad y, en general, capacidad diagnóstica; rapidez, bajo costo y facilidad de aplicación; tolera los componentes de los medios de cultivo y las sustancias biológicas. Entre las desventajas están que la baja concentración de ADN molde disminuye la eficacia del reconocimiento de los cebadores; la observación de la turbidez fue menos sensible que la visualización de los productos en gel de agarosa teñidos con bromuro de etidio y es crítica la prevención de la contaminación.

Palabras clave: Amplificación isotérmica malaria plasmodium diagnóstico.

2009-03-23   |   4,342 visitas   |   8 valoraciones

Vol. 21 Núm.3. Septiembre-Diciembre 2008 Pags. 158-175 Médicas UIS 2008; 21(3)