Aplicación de un método alternativo al conteo en cámara de Neubauer para determinar la concentración de Trichomonas vaginalis

Autores: Meneses Marcel Alfredo, Rojas Rivero Lázara, Sifontes Rodríguez Sergio, López Bueno Yamilé, Sariego Ramos Idalia

Resumen

Se demostró que existe relación entre la concentración celular y la lectura de los parásitos en un lector de ELISA. Se determinó que la absorbancia tiene valores significativos en las longitudes de onda del rango visible y se escogió la longitud de onda mínima posible (450 nm) para garantizar un máximo de sensibilidad. Pudo comprobarse que ocurre un aumento significativo de la absorbancia (p < 0.001) después de llenada la placa, que se estabiliza en el intervalo de 40 min hasta 4 h. Al aplicar 100, 150, 200 ó 300 µL por pozo de las diferentes concentraciones de células se demostró que el volumen óptimo era de 150 µL, se obtuvo un r2 = 0.9986, y resultaron altamente significativos el coeficiente de correlación (p < 0.001) y la pendiente (p < 0.001). En el intervalo de 5 x 104 a 1.5 x 107 células/mL se obtuvo un coeficiente de variación medio de 1.75% (0.25-3.17%). En estas condiciones el límite de cuantificación fue de 5.14 x 104 células/mL. Por último se demostró que hubo significación de la correlación entre el conteo en cámara de Neubauer y la densidad óptica.

Palabras clave: Camaras de difusion de cultivos trichomonas vaginalis aislamiento purificación trichomonas vaginalis crecimiento desarrollo tests de elisa método.

2003-01-14   |   10,169 visitas   |   Evalua este artículo 0 valoraciones

Vol. 53 Núm.3. Septiembre-Diciembre 2001 Pags. 180-188. Rev Cubana Med Trop 2001; 53(3)