Obtención y caracterización de células osteoclásticas derivadas de la médula ósea

Autores: García López Salvador, Villanueva Arriaga Rosina Eugenia, Castillo Ocampo Patricia

Resumen

Objetivo: El propósito fue el de derivar y caracterizar osteoclastos procedidos de la médula ósea para estudiar el proceso de resorción ósea. Material y métodos: Se obtuvieron células madre de la médula ósea de la tibia y del fémur de ambas extremidades de tres ratones hembras recién nacidas (20 días) y diferenciadas en osteoclastos con 100 ng/mL de M-CSF (Peprotech USA) y 100 ng/mL RANKL (Peprotech USA) en un medio de cultivo α-MEM con 10% de suero fetal bovino (FCS Globerfarm) con antibióticos y antimicóticos. Las células obtenidas fueron resuspendidas a una densidad de 1 X 106 en cajas de 24 pozos de 1.5 cm dejando crecer las células a 37 ºC en una atmósfera humidificada de 95% de aire y 5% de CO2. Cinco pozos fueron cultivados con las células obtenidas y cinco pozos fueron cultivados con células y los cortes de dientes para evaluar el proceso de resorción. Resultados: Las células osteoclásticas obtenidas y diferenciadas de la médula ósea fueron confirmadas por medio de la prueba de TRAP +. Se consiguió inducir la resorción en los cortes de dientes a los siete días de cultivo y fueron evaluados con un microscopio invertido y un microscopio electrónico de barrido. Conclusión: Se logró establecer y estandarizar cultivos de osteoclastos derivados de la médula ósea con el fin de estudiar el proceso de remodelación ósea y desarrollar en un futuro terapéuticas novedosas relacionadas con la pérdida del hueso.

Palabras clave: Osteoclastos remodelación ósea médula ósea resorción ósea TRAP +.

2012-10-01   |   1,288 visitas   |   Evalua este artículo 0 valoraciones

Vol. 10 Núm.4. Julio-Agosto 2012 Pags. 139-144 Rev Metab Óseo y Min 2012; 10(4)