Estandarización de la técnica de Western blot para el diagnóstico de la fasciolosis humana utilizando antigenos de excreción-secreción de Fasciola hepatica

Autores: Escalante Añorga Hermes Mario, Davelois A Kelly, Ortiz Cabanillas Pedro, Rodríguez Hans, Díaz L Enrique, Jara C César

Resumen

Objetivos: Evaluar la eficacia de la técnica de electroinmunotransferencia (EITB) o Western blot utilizando antígenos de excreción-secreción de las formas adultas de Fasciola hepatica (Fh E/S Ag) para el diagnóstico de la fasciolosis humana. Materiales y métodos: Los antígenos fueron obtenidos a las 18 horas de incubación en medio Minimum Essential Eagle y preparados a la concentración proteica de 0,15 ug/uL; los cuales, al ser enfrentados con un pool de sueros de pacientes con fasciolosis confirmada por el hallazgo de huevos del parásito en las heces, se detectaron los antígenos de 10, 12, 17, 23, 27, 30, 36, 43, 66 y 136 KDa, con los cuales se desarrolló la técnica de Western blot. La sensibilidad se evaluó empleando sueros de 67 pacientes con fasciolosis, y la especificidad con sueros de 57 pacientes con otras parasitosis y diez sueros de personas no parasitadas. Resultados: De los 67 sueros, 64 reaccionaron con la banda de 23 KDa y 61 con la banda de 17KDa. Estas dos bandas no fueron detectadas por ninguno de los sueros de pacientes con otras parasitosis, ni de personas no parasitadas, siendo por ello consideradas como específicas y diagnósticas. Conclusiones: La sensibilidad de la prueba, utilizando las bandas de 17 y 23 KDa, fue de 95,5% cuando se presenta reacción positiva en una o en las dos bandas, siendo la especificidad para estos dos antígenos de 100% con un valor predictivo positivo de 100% y un valor predictivo negativo de 95,71%.

Palabras clave: Fasciola hepatica; Fascioliasis; Western blot; sensibilidad y especificidad.

2013-05-16   |   332 visitas   |   Evalua este artículo 0 valoraciones

Vol. 28 Núm.3. Julio-Septiembre 2011 Pags. 454-461 Rev Peru Med Exp Salud Publica 2011; 28(3)